Trial design, compliance and ethics approval
Cet essai a été conçu selon les directives de la médecine fondée sur les preuves et rapporté en utilisant les Consolidated Standards of Reporting Trials (CONSORT) -. La conception de l’étude est un essai clinique prospectif, en simple aveugle, à deux bras en parallèle sur le terrain pour la détermination de la posologie. L’étude est conforme à la directive de la Communauté économique européenne sur la démonstration de l’efficacité des médicaments vétérinaires contenant des substances antimicrobiennes. Le comité d’éthique pour les expérimentations animales de l’université d’Helsinki en Finlande et le conseil national des expérimentations animales en Finlande ont approuvé le protocole de l’étude. Les propriétaires ont fourni leur consentement éclairé écrit dans lequel ils ont accepté de participer avec leur chien.
Population de l’étude, critères d’inclusion et d’exclusion
Cette étude a été menée à l’hôpital d’enseignement des petits animaux, Faculté de médecine vétérinaire, Université d’Helsinki, Finlande. La population étudiée a été recrutée à partir des patients d’un essai clinique prospectif contrôlé par placebo, randomisé, en double aveugle, sur l’efficacité de la tylosine orale dans le traitement de la diarrhée récurrente chez les chiens, qui a été mené juste avant cet essai de détermination de la posologie actuelle . Les chiens ont été considérés comme éligibles pour l’essai de détermination de la posologie de la tylosine orale s’ils avaient répondu à un traitement à la tylosine à la dose de 25 mg/kg une fois par jour pendant sept jours dans l’essai susmentionné. Les critères d’inclusion étaient les suivants : les chiens devaient être âgés d’au moins six mois et souffrir de diarrhée récurrente répondant au traitement par la tylosine. Ils ne devaient pas avoir reçu de corticostéroïdes systémiques, d’anti-inflammatoires non stéroïdiens ou d’antibiotiques autres que la tylosine dans les 90 jours précédant l’essai de détermination du dosage de la tylosine. Les chiennes allaitantes étaient exclues, de même que les chiens présentant des signes de maladie systémique ou liée à un organe pouvant provoquer secondairement une diarrhée.
Les chiens ont subi un examen initial avant leur inscription à l’essai d’efficacité de la tylosine afin de s’assurer qu’ils répondaient aux critères de sélection. En bref, l’examen initial comprenait l’histoire clinique et l’examen physique des chiens, des échantillons de sang pour une numération globulaire complète et un profil biochimique sérique, une analyse d’urine, une analyse fécale pour les endoparasites et les bactéries entéropathogènes, et une gastroduodénoscopie avec des biopsies muqueuses du duodénum. Le protocole et les résultats de l’examen initial ont été publiés précédemment .
Mesures des résultats
L’objectif principal de l’essai actuel était d’évaluer si des doses quotidiennes de 5 mg/kg ou 15 mg/kg de tylosine à un intervalle d’une fois par jour pendant sept jours auraient des effets similaires sur la cohérence fécale dans les rechutes de diarrhée à ceux d’une dose initiale de 25 mg/kg de tylosine une fois par jour pendant sept jours chez ces chiens, un dosage qui s’est avéré efficace pour contrôler le TRD canin . En outre, pour évaluer si la dose de 5 mg/kg de tylosine était aussi efficace que la dose de 15 mg/kg. Pour ce faire, l’élimination de la diarrhée a servi de critère principal. L’élimination de la diarrhée a été réalisée en constatant que pendant trois jours consécutifs, le score fécal de chacune des selles du chien était et restait égal ou inférieur à trois. Un score moyen de consistance fécale attribué pendant les trois derniers jours de la période de traitement de sept jours a servi de critère principal. Pour déterminer le score moyen de consistance des selles, les propriétaires ont évalué et noté tout au long de l’étude la consistance de chacune des selles de leur chien selon un système standardisé de notation des selles établi précédemment par Moxham . Ce type de système de notation fécale s’est avéré utile pour évaluer le succès du traitement chez les patients atteints de diarrhée,,-. En bref, le système de notation fécale est basé sur une échelle de neuf points, allant de un à cinq, avec des intervalles d’un demi-point. Pour assurer l’uniformité du système de notation de la consistance fécale, il comprend à la fois une description verbale et une image visuelle pour chacun des scores de consistance fécale. Les scores 1 et 1,5 représentent des selles de consistance dure et sèche. Les scores 2 et 2,5 indiquent des selles bien formées qui ne laissent aucune trace lorsqu’elles sont ramassées. Un score de 3 représentait des selles de consistance légèrement humide, tandis que le score 3,5 représentait des selles de consistance humide, mais qui avaient encore une forme définie. Les scores 4 à 5 décrivaient des fèces de mauvaise consistance.
Pour évaluer si le dosage de la tylosine était efficace, l’investigateur a calculé un score moyen de consistance fécale des scores attribués pour chacune des fèces du chien pendant les trois derniers jours de la période de traitement de sept jours, sur la base des enregistrements du propriétaire. Un répondant était défini comme ayant un score moyen de consistance fécale de trois ou moins ; un non-répondant avait un score supérieur à trois. Les propriétaires n’avaient pas connaissance de ces définitions.
Des mesures de résultats secondaires ont été définies afin d’évaluer le taux de récurrence et le délai de récurrence de la diarrhée à une dose de 25 mg/kg de tylosine. La récurrence de la diarrhée a été définie comme le moment où les selles du chien présentaient un score de consistance d’au moins quatre sur l’échelle pendant au moins deux défécations consécutives. D’autres mesures secondaires ont été définies pour évaluer l’influence des trois doses différentes de tylosine (5, 15 et 25 mg/kg) sur le moment de l’arrêt de la diarrhée. Le jour où la diarrhée a cessé a été défini comme le jour de la période de traitement où le score fécal de chacune des selles du chien était et est resté égal ou inférieur à trois.
Interventions
Lors de l’évaluation de l’éligibilité des chiens pour ce présent essai de détermination de la posologie, tous les chiens ont présenté une diarrhée et ont commencé leur traitement par tylosine à une dose de 25 mg/kg une fois par jour pendant sept jours. Les propriétaires des chiens ont évalué et noté la consistance des selles de chacun de leurs chiens. Au septième jour de la période de traitement, chaque chien a subi un examen physique et les données sur la consistance de ses selles ont été recueillies. L’investigateur a noté le jour où la diarrhée du chien a cessé et a calculé un score moyen de consistance fécale pour chaque chien au cours des trois derniers jours de la période de traitement à une dose de tylosine de 25 mg/kg ; les chiens définis comme répondeurs ont été jugés éligibles pour participer à l’essai de détermination de la dose. Le traitement à 25 mg/kg de tylosine a ensuite été interrompu pour les chiens participants et une période de suivi allant jusqu’à deux mois a permis de déterminer si la diarrhée réapparaissait. Aucun autre changement n’a été autorisé dans l’alimentation ou la médication du chien. Lorsque les critères de récurrence de la diarrhée étaient remplis (score fécal ≥ 4 pour au moins deux défécations consécutives), chaque chien a subi un examen physique, au cours duquel l’investigateur a également évalué et confirmé la consistance des selles par palpation rectale. Les chiens ont ensuite reçu de la tylosine (tartrate de tylosine en comprimés de 120 mg et 240 mg, University Pharmacy, Helsinki, Finlande ; équivalent à 100 mg et 200 mg de tylosine) une fois par jour pendant sept jours à des doses de 5 mg/kg ou 15 mg/kg.
Pendant la période de traitement de sept jours, les propriétaires ont continué à évaluer chacune des selles de leur chien et ont enregistré sa consistance fécale conformément aux directives. Le troisième jour, l’investigateur a téléphoné au propriétaire pour s’assurer que l’état clinique du chien répondait aux critères du point final humain de l’étude et si le chien devait être libéré de l’étude et traité en conséquence. Le critère d’arrêt sans cruauté était défini comme le moment où l’état clinique du chien était mauvais et où il souffrait de diarrhée excessive. Le septième jour, le chien a subi un deuxième examen physique, comprenant une palpation rectale et une évaluation de la consistance des selles. Les enregistrements de la consistance fécale ont été collectés, et un score moyen de consistance fécale a été calculé pour chaque chien sur la base des trois derniers jours de la période de traitement aux doses de 5 mg/kg ou 15 mg/kg.
Allocation aux groupes de traitement
Après l’apparition de la diarrhée au cours de la période de suivi de deux mois, les chiens ont reçu un numéro d’étude croissant indiquant l’ordre dans lequel la diarrhée est réapparue de manière aléatoire. L’investigateur a ensuite assigné les chiens dans un rapport 1:1 à deux groupes de dosage différents – soit 5 mg/kg ou 15 mg/kg – recevant de la tylosine par voie orale une fois par jour pendant sept jours. Tous les chiens ayant un numéro d’étude impair ont été affectés au groupe de dosage de 5 mg/kg, et ceux ayant un numéro d’étude pair au groupe de dosage de 15 mg/kg.
L’étude était en simple aveugle et donc ouverte pour l’investigateur mais en aveugle pour le propriétaire du chien. La procédure d’aveugle a été réalisée en étiquetant les flacons de comprimés de tartrate de tylosine 120 mg comme « Tylosin tart. S » et les flacons de comprimés de tartrate de tylosine à 240 mg par « Tylosin tart. V ». Les comprimés étaient visuellement identiques.
Méthodes statistiques
Des statistiques descriptives ont été utilisées pour résumer les données. Le test de Shapiro-Wilk a servi à déterminer si les données étaient normalement distribuées ; les données non paramétriques ont été exprimées sous forme de médiane et d’étendue. Le test des rangs signés de Wilcoxon a été utilisé pour les données non paramétriques afin de comparer les scores moyens de consistance fécale des trois derniers jours de la période de traitement à la dose de 25 mg/kg de tylosine aux scores obtenus aux doses de 15 mg/kg et de 5 mg/kg de tylosine. Le test U de Mann-Whitney a été utilisé pour examiner les différences entre les scores moyens de consistance fécale dans les groupes recevant 5 mg/kg et 15 mg/kg de tylosine. Pour évaluer l’effet de chaque dose sur le délai d’arrêt de la diarrhée, le test des rangs signés de Wilcoxon et le test U de Mann-Whitney ont été utilisés. Le niveau de signification statistique a été fixé à P < 0,05 ; toutes les analyses statistiques ont été réalisées avec un logiciel statistique disponible dans le commerce (SPSS 18.0 pour Windows).