Ana Navarro est née au Nicaragua. En 1980, à la suite de la révolution sandiniste, elle et sa famille ont immigré aux États-Unis.
Navarro est diplômée de l’université de Miami. En 1993, elle a obtenu une licence en arts avec des majeures en études latino-américaines et en sciences politiques. Elle a obtenu un doctorat en droit en 1997. Elle possède une expertise sur les questions latino-américaines et hispaniques.
Elle a été la coprésidente nationale du conseil consultatif hispanique de John McCain et a été un substitut national pour la campagne 2008 de McCain. Elle a joué un rôle dans plusieurs courses fédérales et étatiques en Floride. Plus récemment, elle a été coprésidente nationale hispanique de la campagne 2012 du gouverneur Jon Huntsman. Elle est contributrice politique à CNN et CNN en Español.
En 1997, elle a été conseillère spéciale auprès du gouvernement du Nicaragua et à ce titre, elle a été l’un des principaux défenseurs de NACARA (Nicaraguan Adjustment and Central American Relief Act)
Navarro a fait partie de l’équipe de transition du gouverneur Jeb Bush et a été son premier directeur de la politique d’immigration au sein du bureau exécutif du gouverneur. En 1999, elle est retournée dans le secteur privé et a représenté des clients privés et publics sur des questions fédérales, notamment liées à l’immigration, au commerce et à la politique touchant l’Amérique centrale. En 2001, elle a été ambassadrice auprès de la Commission des droits de l’homme des Nations unies et a été un fervent défenseur de la condamnation du gouvernement de Cuba pour les violations des droits de l’homme.