Activités pharmacologiques in-vivo du calendula officinalis
Activités antidiabétique et anti hyperlipidémique : Le diabète a été induit chez le rat par une seule injection intrapéritonéale d’alloxan (150mg/kg) de poids corporel. Le niveau de glucose dans le sang et le niveau de sucre dans l’urine étaient significativement élevés chez les rats diabétiques par rapport aux rats normaux. L’administration orale d’un extrait hydro-alcoolique de Calendula officinalis à des rats diabétiques à la dose de 25 et 50mg/kg de poids corporel a permis de réduire significativement la glycémie et le taux de sucre dans l’urine par rapport au groupe de rats diabétiques. L’extrait hydro-alcoolique de Calendula officinalis chez les rats diabétiques à la dose de 100mg/kg de poids corporel s’est avéré très significatif car il a rétabli tous les paramètres aux niveaux normaux de glucose sanguin, de sucre urinaire et de lipides sériques chez les rats diabétiques alloxanes. L’extrait augmente le niveau d’hémoglobine totale. L’extrait était similaire à celui de l’insuline. Ainsi, l’enquête montre clairement que l’extrait hydro-alcoolique de Calendula officinalis a des effets antidiabétiques et antihyperlipidémiques.49 Les structures des officinosides ont été élucidées sur la base de preuves chimiques et physicochimiques. Les activités inhibitrices des principales saponines des fleurs de C. officinalis sur l’augmentation des niveaux de glucose sérique chez les rats chargés de glucose par voie orale, sur la vidange gastrique chez les souris chargées d’un repas test au sel de sodium de carboxy méthyl cellulose, et sur les lésions de la muqueuse gastrique induites par l’éthanol ou l’indométhacine chez les rats et ont également discuté des exigences de structure pour ces activités.50
Activités cardiovasculaires : Calendula officinalis pourrait être cardio-protecteur contre la cardiopathie ischémique .Deux groupes de cœurs ont été utilisés : les cœurs de rats traités ont été perfusés avec une solution de Calendula officinalis à 50mM dans un tampon KHB (en mM) chlorure de sodium 118mM, chlorure de potassium 4.7mM, chlorure de calcium 1,7mM, bicarbonate de sodium 25mM, biphosphate de potassium 0,36mM, sulfate de magnésium 1,2mM et glucose 10mM) pendant 15 minutes avant de soumettre le cœur à l’ischémie, tandis que le groupe témoin a été perfusé avec le tampon uniquement. Le calendula a assuré une protection cardiaque en stimulant la pression développée par le ventricule gauche et le débit aortique, ainsi qu’en réduisant la taille de l’infarctus du myocarde et l’apoptose des cardiomyocytes. La protection cardiaque semble être obtenue en transformant le signal de mort médié par l’ischémie et la reperfusion en un signal de survie par la modulation des voies antioxydantes et anti-inflammatoires, comme en témoigne l’activation d’Akt et de Bcl2 et la dépression du TNFα. Ces résultats renforcent encore le concept d’utilisation des produits naturels dans les maladies de dégénérescence comme les cardiopathies ischémiques.51
Activités hépatoprotectrices : L’extrait méthanolique à 80% des feuilles de Calendula officinalis a été étudié contre les dommages hépatiques induits par l’acétaminophène chez 30 rats albinos mâles. L’acétaminophène produit une mortalité de 100% à la dose de 1gm/kg chez les souris, tandis que le prétraitement des souris avec Calendula officinalis (1.0gm/kg) réduit la mort à 30%. Le prétraitement des souris avec un extrait de feuilles (500mg/kg par voie orale, quatre doses à 12 heures d’intervalle) a empêché (p<0,05) l’augmentation des transaminases sériques (GOT, GPT), de la bilirubine sérique et de la phosphatase alcaline sérique induite par l’acétaminophène (640mg/kg). Le post-traitement avec trois doses successives d’extrait de feuilles (500mg/kg. 6 heures)) a limité les dommages hépatiques induits par l’acétaminophène (p<0,05).52
Effets antioxydants : Un extrait de Calendula officinalis Linn, a été évalué pour son potentiel antioxydant par l’administration orale d’un extrait alcoolique de Calendula inhibe la génération de superoxyde dans les macrophages chez les souris suisses albinos femelles par 12,6% et 38,7% à des doses de 100 et 250 mg=kg de poids corporel. L’administration orale de Calendula officinalis à des souris pendant 1 mois a augmenté de manière significative l’activité de la catalase. L’extrait a produit une augmentation significative des niveaux de glutathion dans le sang et le foie. La glutathion réductase a été trouvée augmentée, tandis que la glutathion peroxydase a été trouvée diminuée après l’administration de l’extrait de Calendula.53
Activités anthelminthiques : Les fleurs et les feuilles séchées de C. officinalis ont une activité anthelminthique. L’extrait aqueux de fleurs et de feuilles séchées de C. officinalis a été préparé par la méthode de décoction. L’essai a été effectué sur un ver de terre adulte indien, en raison de sa ressemblance anatomique et physiologique avec le parasite du ver rond intestinal de l’être humain. Les extraits de fleurs et de feuilles de Calendula officinalis ont également montré une activité anthelminthique ; les extraits bruts de fleurs et de feuilles de C. officinalis ont démontré une paralysie à 56,5 minutes et la mort des vers à 111,2 minutes. Les plantes contiennent des saponines et ont également montré un potentiel anthelmintique qui sont en accord avec les rapports précédents qui révèlent que les saponines sont connues pour avoir une activité anthelmintique.54
Activités anti-inflammatoires : L’extrait éthanolique de Calendula officinalis possède une activité anti-inflammatoire significative contre l’œdème de la patte induit par le carraghénane et le dextran. L’administration orale de 250 et 500mg/kg de poids corporel d’extrait de Calendula officinalis a produit une inhibition significative (50,6 et 65,9% respectivement) de l’œdème de la patte de l’animal induit par la carragénine et 42,9 et 42,4% respectivement de l’inflammation produite par le dextran. Dans le modèle anti-inflammatoire chronique utilisant le formol, l’administration de 250 et 500mg/kg de poids corporel d’extrait de calendula a produit une inhibition de 32,9 et 62,3% respectivement par rapport aux contrôles. La production de TNF-α par une culture de macrophages traités avec du lipopolysaccharide (LPS) s’est avérée être significativement inhibée par l’extrait. De plus, les niveaux accrus de cytokines pro-inflammatoires IL-1β, IL-6, TNF-α et IFN-γ et la protéine de phase aiguë, la protéine C réactive (CRP) chez les souris produites par l’injection de LPS ont été inhibés de manière significative par l’extrait. Le niveau de cyclooxygénase-2 (Cox-2) induit par le LPS dans la rate des souris a également été inhibé par le traitement de l’extrait. Les résultats ont montré que la réponse anti-inflammatoire puissante de l’extrait de C. officinalis peut être médiée par l’inhibition des cytokines pro-inflammatoires et de la Cox-2 et la synthèse subséquente des prostaglandines.24 L’application topique d’un extrait éthanolique à 70 % des fleurs à des souris à une dose de 1,2 mg/oreille (correspondant à 4,16 mg de médicament brut) a réduit de 20 % l’œdème d’oreille induit par l’huile de croton. L’application externe d’un extrait de fleurs au dioxyde de carbone (300mg/cm2) a supprimé l’œdème d’oreille induit par l’huile de croton chez les souris.55
Cicatrisation des plaies et activités angiogéniques : L’activité angiogénique de l’extrait éthanolique et des fractions dichlorométhane et hexanique de Calendula officinalis L. (Asteraceae) a été évaluée en utilisant des modèles 36 rats et 90 œufs embryonnés pour évaluer la cicatrisation et les activités angiogéniques des extraits et des fractions de la plante, par l’induction de plaies cutanées et de la membrane chorioallantoïque, respectivement. L’effet de la prolifération vasculaire a également été testé à partir de l’étude pour vérifier l’intensité de l’expression du facteur de croissance endothélial vasculaire (VEGF) dans les plaies cutanées chez les rats. Dans l’évaluation morphométrique, une augmentation de la surface vasculaire et du pourcentage de zones marquées en rouge a été observée dans les CAM traités comme contrôle positif 1% (17 ß-estradiol), extrait éthanolique 1%, fraction dichlorométhane 1% et fraction hexanique 1%, par rapport au contrôle solvant (éthanol 70%). La planimétrie numérique par comptage de points réalisée sur des souris dermatées avec l’extrait éthanolique 1% a révélé une augmentation du nombre de vaisseaux sanguins par rapport au contrôle par solvant.56 Ils ont rapporté une différence statistiquement significative dans la réduction de la surface totale de la plaie par rapport au contrôle (p<0,05), montrant une diminution globale de 41,71% dans le groupe expérimental par rapport à 14,52% dans le groupe témoin. Ils concluent que l’application d’un extrait de Calendula augmente significativement l’épithélisation dans les ulcérations veineuses chroniques. La thérapie au souci offre un traitement non invasif et doux pour les verrues plantaires difficiles à traiter, les lésions hyperkératosiques douloureuses et les bourses enflammées secondaires à l’hallux abducto valgus.57
Activités anticancéreuses : Les résultats obtenus indiquent qu’aucun des extraits n’a eu un effet mitogène direct sur les lymphocytes ou les thymocytes humains (indice de stimulation, SI<0,07). Parmi les plantes étudiées, C. officinalis a montré un effet inhibiteur complet sur la prolifération des lymphocytes en présence de PHA (intervalle SI 0,01-0,49).58
Activités pharmacologiques in vitro de calendula officinalis
Activités hépatoprotectrices : Les effets hépatoprotecteurs potentiels des extraits de Calendula officinalis et de morus Alba contre la cytotoxicité et le stress oxydatif induits par le tétrachlorure de carbone (CCl4) dans les hépatocytes primaires isolés de rat. L’effet dose-réponse de différentes concentrations d’extraits de Calendula officinalis et de Morus Alba (1, 10, 100 et 1000µg/ml) sur la diminution de la viabilité des hépatocytes isolés de rat induite par le CCl4. Les hépatocytes ont été isolés par la technique de perfusion de collagénase en deux étapes. La cytotoxicité a été déterminée en évaluant la viabilité cellulaire et la fuite des enzymes cytosoliques, comme l’alanine aminotransférase (ALT), l’aspartate aminotransférase (AST) et la lactate déshydrogénase (LDH). Le stress oxydatif a été évalué en déterminant le niveau de glutathion réduit (GSH) et la peroxydation lipidique comme indiqué par la production de substances réactives de l’acide thiobarbiturique (TBARS). L’exposition d’hépatocytes de rat isolés au CCl4 a provoqué une cytotoxicité et des lésions oxydatives, manifestées par une perte de viabilité cellulaire et une augmentation significative des fuites d’ALT, d’AST et de LDH. De même, le CCl4 a provoqué une diminution progressive de la teneur en GSH intracellulaire et une augmentation significative de l’accumulation de TBARS. La pré-incubation des hépatocytes avec des extraits de Calendula officinalis ou de Morus alba a amélioré l’hépatotoxicité et le stress oxydatif induits par le CCl4, comme l’indique l’amélioration significative de la viabilité cellulaire et des fuites d’enzymes (ALT, AST et LDH). De même, une amélioration significative de la teneur en GSH et une diminution significative de la formation de TBARS par rapport aux cellules traitées au CCl4. L’effet dose-réponse de différentes concentrations d’extraits de Calendula officinalis et de Morus alba (1, 10, 100 et 1000µg/ml) sur la diminution de la viabilité des hépatocytes isolés de rat induite par le CCl4. Les résultats ont révélé que le CCl4 (5mM) a induit une diminution significative de la viabilité des hépatocytes isolés de rat après 30 minutes d’incubation. Cette diminution de la viabilité était dépendante du temps par rapport à un groupe témoin.59
Activités antibactériennes : Les extraits éthanoliques et aqueux de Calendula officinalis inhibent la croissance des bactéries utilisées dans l’étude, à des concentrations allant de 125µg/ml à 64mg/ml. L’extrait méthanolique a inhibé la croissance de S. aureus et E. coli à 64mg/ml. L’extrait aqueux de Calendula officinalis a montré la plus grande activité antibactérienne contre toutes les bactéries testées. S. aureus s’est avéré être plus sensible que les autres bactéries.60 Les activités antibactériennes de Calendula officinalis Linn. La poudre de feuilles séchées de Calendula officinalis a été successivement extraite avec de l’éther de pétrole, du chloroforme et de l’éthanol à l’aide d’un Soxhlet et macérée pour former un extrait aqueux. Tous les extraits ont été analysés pour leur activité antibactérienne et antifongique en utilisant la méthode de diffusion en puits d’agar. Les micro-organismes utilisés pour les activités antibactériennes et antifongiques étaient Bacillus subtulis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsiella pneumonia, Candida albicans et Aspergillus niger. La gentamicine 5µg/ml a été utilisée comme standard. Les extraits présentant une activité antimicrobienne ont été soumis à un test de concentration minimale inhibitrice par la méthode des dilutions doubles. Les extraits d’éther de pétrole, de chloroforme, d’éthanol et d’eau ont présenté une activité antibactérienne in vitro.61 L’activité antimicrobienne des extraits éthanolique, méthanolique, acétone et chloroforme de C. officinalis a été étudiée contre les souches bactériennes gram-positives Escherichia coli, Staphylococcus anrens, et les souches gram-négatives Salmonella typhae et Vibrio cholera. La souche fongique utilisée était Candida albicans. L’extrait éthanolique a donné une activité contre E. coli, Vibrio cholera et Candida albicans. L’extrait méthanolique n’a donné des résultats que contre Candida albicans. Le chloroforme a donné une activité antimicrobienne contre tous les microbes tandis que l’acétone a donné seulement contre E. coli.62
Activités anticancéreuses : Les extraits flavonoïdes (0,05-50µg/ml) n’ont pas provoqué d’effet significatif sur la prolifération de deux lignées cellulaires. Cela peut être lié à la molécule de sucre attachée à la position 3 des flavones qui peut réduire sa capacité à lier l’aromatase et d’autres enzymes.63 Treize saponines ont été isolées et identifiées à partir de Calendula officinalis, C. arvensis et Hedera helix. Les activités mutagènes et antimutagènes de ces produits ont été étudiées à l’aide d’une technique d’incubation liquide modifiée de l’essai Salmonella/microsomal. Le mélange de souches de Salmonella TA98±S9 a été utilisé. Le dépistage de l’activité antimutagène a été effectué avec un promutagène connu : le benzo-pyrène et un concentré d’urine mutagène provenant d’un fumeur. Les activités antimutagènes ont également été comparées à l’activité de la chlorophylline. Toutes les saponines se sont révélées non toxiques et non mutagènes pour des doses de 400/µg.64
Activités anti-inflammatoires : L’extrait hydro-alcoolique de Calendula officinalis peut supprimer les activités de la 5-lipoxygénase (5-LO) et de la cyclooxygénase-2 (COX-2) (enzymes clés) dans la formation d’eicosanoïdes pro inflammatoires à partir de l’acide arachidonique.65 L’apparition de dermatites aiguës de grade 2 ou plus était significativement plus faible (41% v 63% ; P<.001) avec l’utilisation de calendula qu’avec la trolamine. De plus, les patients recevant du calendula avaient une interruption moins fréquente de la radiothérapie et une réduction significative des douleurs radio-induites. Le calendula est très efficace pour la prévention de la dermatite aiguë de grade 2 ou plus et devrait être proposé aux patients subissant une irradiation postopératoire pour un cancer du sein.66
Activités antioxydantes : L’extrait aqueux des pétales a montré une activité antioxydante plus élevée que celle des feuilles. Les résultats obtenus dans la présente étude indiquent que les feuilles et les pétales de Calendula officinalis sont une source potentielle d’antioxydants naturels.67 Un extrait alcoolique de Calendula officinalis Linn (Composite) a été évalué pour son potentiel antioxydant in vitro. On a constaté que l’extrait de Calendula officinalis éliminait les radicaux superoxydes générés par la photo-réduction de la riboflavine et les radicaux hydroxyles générés par la réaction de Fenton et inhibait la peroxydation lipidique in vitro. Les concentrations nécessaires pour une inhibition de 50 % (IC50) étaient de 500, 480 et 2000 mg=mL, respectivement. L’extrait a piégé les radicaux ABTS et DPPH et les IC50 étaient de 6,5 et 100 mg=mL, respectivement.68 Pour l’extrait de Calendula officinalis d’une concentration de 7,5mg/ml, la LPO a diminué lentement avec la dose de 68% à 40% à 20kGy. La LPO de l’extrait de Calendula officinalis à la concentration de 3,75 mg/ml a diminué soudainement de 56 % à 28 % à la dose de 1 kGy. Ensuite, elle a diminué lentement avec la dose.69
Activités anti-VIH : Un extrait chloroforme des fleurs a inhibé la réplication du VIH-1 dans les cellules lymphocytaires MOLT-4 infectées de façon aiguë in vitro (IC50 0,4mg/ml). Un extrait chloroforme a également inhibé l’activité de la transcriptase inverse du VIH-1 de manière dose-dépendante (ED50 51,0mg/ml).70