Cross-bridge schema en kracht per cross-bridge toestand in gevilde konijn psoas spiervezels

De snelheids- en associatieconstanten (kinetische constanten) die een zeven toestanden tellend cross-bridge schema omvatten werden afgeleid door sinusoïdale analyse in chemisch gevilde konijn psoas spiervezels bij 20 graden C, 200 mM ionensterkte, en tijdens maximale Ca2+ activering (pCa 4.54-4.82). De kinetische constanten werden vervolgens gebruikt om de steady state waarschijnlijkheid van cross-bridges in elke toestand te berekenen als functie van MgATP, MgADP, en fosfaat (Pi) concentraties. Deze berekening toonde aan dat 72% van de beschikbare cross-bridges (sterk) gehecht waren tijdens onze controle activering (5 mM MgATP, 8 mM Pi), hetgeen ongeveer overeenkwam met de stijfheidsverhouding (actief:rigor, 69 +/- 3%); actieve stijfheid werd gemeten tijdens de controle activering, en rigor stijfheid na een inductie van de rigor toestand. Door aan te nemen dat de isometrische spanning een lineaire combinatie is van de waarschijnlijkheid van kruisbruggen in elke toestand, en door de spanning te meten als functie van MgATP, MgADP, en Pi concentraties, leidden we de kracht af die geassocieerd is met elke kruisbrugtoestand. Gegevens van de osmotische compressie van spiervezels door dextran T500 werden gebruikt om de kracht af te leiden die geassocieerd wordt met één van de cross-bridge toestanden. Onze resultaten tonen aan dat de kracht het grootst is in de AM*ADP.Pi toestand (A = actine, M = myosine). Aangezien de toestand die leidt tot de AM*ADP.Pi toestand de zwak gehechte AM.ADP.Pi toestand is, bevestigen we dat de krachtontwikkeling optreedt bij de Pi isomerisatie (AM.ADP.Pi –> AM*ADP.Pi). Onze resultaten tonen ook aan dat een minimale krachtverandering optreedt bij het vrijkomen van Pi of MgADP, en dat de kracht geleidelijk afneemt bij ADP-isomerisatie (AM*ADP –>AM.ADP), ATP-isomerisatie (AM+ATP–>AM*ATP), en bij loskoppeling van de cross-bridge. Kracht van de AM toestand kwam goed overeen met kracht gemeten na inductie van de rigor toestand, wat aangeeft dat de AM toestand een goede benadering is van de rigor toestand. De stijfheidsresultaten verkregen als functies van MgATP, MgADP, en Pi concentraties waren over het algemeen consistent met het cross-bridge schema.

Geef een reactie

Het e-mailadres wordt niet gepubliceerd. Vereiste velden zijn gemarkeerd met *