Esquema de ponte-cruzada e força por estado de ponte-cruzada em fibras musculares de psoas de coelho esfolado

As constantes de taxa e associação (constantes cinéticas) que compreendem um esquema de sete estados de ponte-cruzada foram deduzidas pela análise sinusoidal em fibras musculares de psoas de coelho esfolado quimicamente a 20 graus C, 200 mM de força iónica, e durante a activação máxima de Ca2+ (pCa 4.54-4.82). As constantes cinéticas foram então utilizadas para calcular a probabilidade de estado estacionário das pontes cruzadas em cada estado como função das concentrações de MgATP, MgADP, e fosfato (Pi). Este cálculo mostrou que 72% das pontes cruzadas disponíveis foram (fortemente) ligadas durante a activação do nosso controlo (5 mM MgATP, 8 mM Pi), o que concordou aproximadamente com a razão de rigidez (active:rigor, 69 +/- 3%); a rigidez activa foi medida durante a activação do controlo, e a rigidez de rigor após uma indução do estado de rigor. Assumindo que a tensão isométrica é uma combinação linear de probabilidades de pontes transversais em cada estado, e medindo a tensão em função das concentrações de MgATP, MgADP, e Pi, deduzimos a força associada a cada estado de ponte transversal. Os dados da compressão osmótica das fibras musculares por dextran T500 foram utilizados para deduzir a força associada a um dos estados de ponte-cruzada. Os nossos resultados mostram que a força é mais elevada no estado AM*ADP.Pi (A = actin, M = myosin). Como o estado que leva ao estado AM*ADP.Pi é o estado AM.ADP.Pi pouco ligado, confirmamos que o desenvolvimento da força ocorre na isomerização de Pi (AM.ADP.Pi –> AM*ADP.Pi). Os nossos resultados também mostram que ocorre uma mudança mínima de força com a libertação de Pi ou MgADP, e que a força diminui gradualmente com a isomerização ADP (AM*ADP –>AM.ADP), isomerização ATP (AM+ATP–>AM*ATP), e com o desprendimento da ponte transversal. A força do estado AM concordou bem com a força medida após a indução do estado de rigor, indicando que o estado AM é uma aproximação estreita do estado de rigor. Os resultados de rigidez obtidos como funções do MgATP, MgADP, e concentrações de Pi foram geralmente consistentes com o esquema de ponte-cruzada.

Deixe uma resposta

O seu endereço de email não será publicado. Campos obrigatórios marcados com *