Electroforese é um processo electrocinético que separa partículas carregadas num fluido utilizando um campo de carga eléctrica. É mais frequentemente utilizado nas ciências da vida para separar moléculas de proteínas ou ADN e pode ser alcançado através de vários procedimentos diferentes, dependendo do tipo e tamanho das moléculas. Os procedimentos diferem em alguns aspectos mas todos necessitam de uma fonte para a carga eléctrica, um meio de suporte e uma solução tampão. A electroforese é utilizada em laboratórios para a separação de moléculas com base no tamanho, densidade e pureza.
Como funciona?
Um campo eléctrico é aplicado às moléculas e como elas próprias são carregadas electricamente, resulta numa força que actua sobre elas. Quanto maior for a carga da molécula, maior será a força aplicada pelo campo eléctrico e, portanto, quanto mais longe, através do meio de suporte, a molécula mover-se-á em relação à sua massa.
Alguns exemplos de aplicações da electroforese incluem a análise do ADN e do ARN, bem como a electroforese de proteínas, que é um procedimento médico utilizado para analisar e separar as moléculas encontradas numa amostra de fluido (mais frequentemente amostras de sangue e urina).
Tipos de electroforese
Diferentes tipos de géis são normalmente utilizados como meio de suporte para electroforese e este pode ser em forma de laje ou tubo, dependendo do que é mais benéfico. As placas de gel permitem a execução simultânea de muitas amostras, pelo que são frequentemente utilizadas em laboratórios. No entanto, os géis de tubo dão uma melhor resolução dos resultados, pelo que são frequentemente escolhidos para electroforese de proteínas.
Agarose gel é normalmente utilizado para electroforese do ADN. Tem uma grande estrutura de poros permitindo que moléculas maiores se movam facilmente, mas não é adequado para sequenciar moléculas mais pequenas.
A electroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) tem uma resolução mais clara do que o gel de agarose, tornando-o mais adequado para análise quantitativa. Isto torna possível identificar a forma como as proteínas se ligam ao ADN. Também pode ser utilizado para desenvolver a compreensão de como as bactérias estão a tornar-se resistentes aos antibióticos através da análise plasmídica.
2D A electroforese separa as moléculas ao longo de um eixo x e um eixo y – uma separando-as por carga e a outra por tamanho.