Le preparazioni di idrossido di potassio (KOH) rimangono un test importante per la diagnosi rapida e accurata delle infezioni fungine superficiali note come dermatofitosi. Questo strumento è stato usato per almeno 100 anni, con la prima terminologia che si riferiva ad esso come potassa; nell’ultimo secolo, è stata in gran parte una tecnica tramandata come un’abilità da maestro tecnico ad apprendista. Il pioniere originale della preparazione KOH rimane un mistero.1
Esistono variazioni sulle tecniche di esecuzione della preparazione KOH, e consigli e trucchi sull’uso di questo test sono un argomento caldo tra i dermatologi.2 Anche se le pubblicazioni specifiche per l’assistenza primaria e la dermatologia sposano l’importanza della preparazione KOH,3,4 purtroppo è stata identificata ed etichettata come uno degli strumenti diagnostici dimenticati.5
È compito dei dermatologi educare gli studenti di medicina e gli specializzandi utilizzando un metodo semplice e specifico per garantire che questa tecnica semplice ed efficace, con una sensibilità riportata tra l’87% e il 91% a seconda della competenza dell’esaminatore,6 resti parte dell’armamentario clinico. Una preoccupazione nell’istruzione di grandi gruppi di studenti e clinici è la pronta accessibilità o disponibilità di campioni di pelle vitale. Questo articolo descrive un metodo di raccolta e conservazione dei campioni di pelle che consentirà agli educatori di formare grandi gruppi di studenti sull’esecuzione delle preparazioni KOH senza dover cercare ripetutamente campioni di pelle o pazienti con infezioni cutanee superficiali. Una descrizione dettagliata della pedagogia utilizzata per insegnare la preparazione e l’interpretazione dei vetrini KOH ad un grande gruppo di studenti è anche rivista.
Raccolta dei campioni
Il primo passo per insegnare la preparazione KOH ad un grande gruppo è la raccolta di un numero adeguato di raschiature della pelle da pazienti con un’infezione superficiale della pelle da funghi (ad esempio, tinea corporis, tinea versicolor). Una tecnica comune per ottenere campioni di pelle è quella di utilizzare una lama di bisturi no. 15 (Figura 1) per raschiare le squame della lesione al suo bordo squamoso una volta che l’area è inumidita con un tampone di alcool o acqua e sapone.7 L’umidità del tampone di alcool permette alle squame di aderire al no. 15, facilitando la raccolta. Una volta raccolta una quantità adeguata di squame, queste vengono poste su un vetrino da microscopio spalmando le squame dalla lama sul vetrino. Questo processo è stato modificato per facilitare una maggiore quantità di campione come segue: le placche infette da dermatofiti con le incrostazioni vengono strofinate con la lama n. 15 e le scaglie libere cadono in un contenitore standard per campioni di urina. Questo processo viene ripetuto più volte da siti diversi per catturare le scaglie spostate con il dermatofita. Abbiamo riscontrato che, se i contenitori per campioni sono sigillati ermeticamente e conservati in un ambiente relativamente asciutto e fresco (temperatura ambiente), i campioni possono essere utilizzati per costruire vetrini didattici KOH per almeno 3 anni. Non li abbiamo usati oltre i 3 anni ma sospettiamo che continuerebbero ad essere utilizzabili anche dopo questo tempo.
Figura 1. Raschiatura del bordo anteriore della lesione con una lama di bisturi no. 15 dopo aver pulito l’area con un tampone di alcool. Preparazione dei vetrini
Dato che il tempo per l’insegnamento è spesso limitato, è utile fissare molti raschietti di pelle su un gran numero di vetrini prima della sessione, il che permette agli studenti di aggiungere semplicemente KOH ai vetrini il giorno dell’insegnamento. Per preparare i vetrini in anticipo, è necessario raccogliere i seguenti materiali: una tazza con campioni di pelle, vetrini di vetro, pinze o pinzette, una piccola pipetta, una tazza d’acqua, guanti protettivi e una matita. Dopo aver indossato i guanti protettivi, i grimaldelli o le pinzette vengono utilizzati per recuperare alcune scaglie di calcare dalla tazza del campione e metterle al centro di un vetrino. Usando la pipetta, si aggiungono 1 o 2 gocce d’acqua alla scaglia e si lascia asciugare il vetrino. I vetrini sono segnati con la matita per indicare il lato “su” per evitare che gli studenti applichino la soluzione KOH sul lato sbagliato del vetrino. La scala di pelle è fissata in posizione sul vetrino mentre l’acqua evapora e può essere conservata fino al momento del bisogno in una scatola o cartella standard per vetrini.
Eseguire la preparazione KOH
Il giorno dell’insegnamento, è utile coinvolgere l’intero gruppo di studenti con una lezione introduttiva sullo scopo e sull’uso della preparazione KOH. Al termine, gli studenti si spostano in una stazione di lavoro con tutti i materiali necessari per preparare il vetrino. Ulteriori elementi necessari in questo momento sono la soluzione KOH al 10%, i vetrini coprioggetto e un dispositivo di riscaldamento (es. accendino, becco Bunsen, fiammifero) (opzionale). Gli studenti vengono istruiti a posizionare 1 o 2 scaglie di pelle su un vetrino o a recuperare un vetrino con scaglie di pelle già fissate, e poi aggiungere 1 goccia di soluzione KOH al 10% direttamente al campione (Figura 2). Successivamente, devono posizionare un vetrino coprioggetto sulla goccia di KOH e sul campione di pelle utilizzando una tecnica side-to-side che sposterà la squama in un sottile strato all’interno della soluzione KOH e spingerà via ogni eccesso di soluzione alla periferia (Figura 3). Grandi quantità di soluzione KOH in eccesso dovrebbero essere eliminate con un tovagliolo di carta, carta da lenti o tessuto. La fonte di calore può essere utilizzata per riscaldare delicatamente la parte inferiore del vetrino (Figura 4), ma spesso è sufficiente attendere da 3 a 5 minuti che la soluzione KOH faccia effetto. Il calore accelera la macerazione della scaglia e rende più facile vedere le ife tra i cheratinociti. Alcuni medici raccomandano l’uso del dimetilsolfossido al posto del riscaldamento,8 ma questa soluzione potrebbe non essere disponibile in tutte le strutture di assistenza primaria.