Esquema de puentes cruzados y fuerza por estado de puentes cruzados en fibras musculares del psoas de conejo desolladas

Las constantes de velocidad y asociación (constantes cinéticas) que comprenden un esquema de puentes cruzados de siete estados se dedujeron mediante análisis sinusoidal en fibras musculares del psoas de conejo desolladas químicamente a 20 grados C, 200 mM de fuerza iónica, y durante la activación máxima de Ca2+ (pCa 4.54-4.82). Las constantes cinéticas se utilizaron entonces para calcular la probabilidad de estado estacionario de los puentes cruzados en cada estado como función de las concentraciones de MgATP, MgADP y fosfato (Pi). Este cálculo mostró que el 72% de los puentes cruzados disponibles estaban (fuertemente) adheridos durante nuestra activación de control (5 mM de MgATP, 8 mM de Pi), lo que coincidía aproximadamente con la relación de rigidez (activa:rigor, 69 +/- 3%); la rigidez activa se midió durante la activación de control, y la rigidez de rigor después de una inducción del estado de rigor. Asumiendo que la tensión isométrica es una combinación lineal de las probabilidades de los puentes cruzados en cada estado, y midiendo la tensión como función de las concentraciones de MgATP, MgADP y Pi, dedujimos la fuerza asociada a cada estado de los puentes cruzados. Los datos de la compresión osmótica de las fibras musculares por dextrano T500 se utilizaron para deducir la fuerza asociada a uno de los estados de puentes cruzados. Nuestros resultados muestran que la fuerza es mayor en el estado AM*ADP.Pi (A = actina, M = miosina). Dado que el estado que conduce al estado AM*ADP.Pi es el estado AM.ADP.Pi débilmente unido, confirmamos que el desarrollo de la fuerza se produce en la isomerización de Pi (AM.ADP.Pi –> AM*ADP.Pi). Nuestros resultados también muestran que se produce un cambio de fuerza mínimo con la liberación de Pi o MgADP, y que la fuerza disminuye gradualmente con la isomerización de ADP (AM*ADP –>AM.ADP), la isomerización de ATP (AM+ATP–>AM*ATP), y con el desprendimiento del puente cruzado. La fuerza del estado AM coincidió bien con la fuerza medida tras la inducción del estado de rigor, lo que indica que el estado AM es una aproximación cercana al estado de rigor. Los resultados de rigidez obtenidos como funciones de las concentraciones de MgATP, MgADP y Pi fueron generalmente consistentes con el esquema de puentes cruzados.

Deja una respuesta

Tu dirección de correo electrónico no será publicada. Los campos obligatorios están marcados con *