Actividades farmacológicas in vivo de Calendula officinalis
Actividades antidiabéticas y antihiperlipidémicas: Se indujo la diabetes a la rata mediante una única inyección intraperitoneal de alloxan (150mg/kg) de peso corporal. El nivel de glucosa en sangre y el nivel de azúcar en orina fueron significativamente elevados en las ratas diabéticas en comparación con las ratas normales. La administración oral de extracto hidroalcohólico de Calendula officinalis a ratas diabéticas en dosis de 25 y 50mg/kg de peso corporal redujo significativamente la glucosa en sangre y el azúcar en orina en comparación con el grupo de ratas diabéticas. El extracto hidroalcohólico de Calendula officinalis en ratas diabéticas a una dosis de 100mg/kg de peso corporal resultó ser altamente significativo, ya que restauró todos los parámetros a los niveles normales de glucosa en sangre, azúcar en orina y lípidos séricos en ratas diabéticas con aloxano. El extracto aumenta el nivel de hemoglobina total. El extracto fue similar al de la insulina. Por lo tanto, la investigación muestra claramente que el extracto hidroalcohólico de Calendula officinalis tiene efectos tanto antidiabéticos como antihiperlipidémicos.49 Las estructuras de los officinosides se dilucidaron sobre la base de pruebas químicas y fisicoquímicas. Las actividades inhibitorias de las principales saponinas de las flores de C. officinalis sobre el aumento de los niveles de glucosa en suero en ratas cargadas de glucosa por vía oral, sobre el vaciado gástrico en ratones cargados con la prueba de la sal sódica de carboximetilcelulosa, y sobre las lesiones de la mucosa gástrica inducidas por etanol o indometacina en ratas, y también se discutieron los requisitos de estructura para estas actividades.50
Actividades cardiovasculares: Calendula officinalis podría ser cardioprotectora contra la cardiopatía isquémica .Se utilizaron dos grupos de corazones: los corazones de rata tratados fueron perfundidos con solución de Calendula officinalis a 50mM en tampón KHB (en mM) cloruro sódico 118mM, cloruro potásico 4.7mM, cloruro de calcio 1,7mM, bicarbonato de sodio 25mM, bifosfato de potasio 0,36mM, sulfato de magnesio 1,2mM y glucosa 10mM) durante 15 minutos antes de someter el corazón a isquemia, mientras que el grupo de control fue perfundido sólo con el tampón. La caléndula logró la cardioprotección al estimular la presión desarrollada por el ventrículo izquierdo y el flujo aórtico, así como al reducir el tamaño del infarto y la apoptosis de los cardiomiocitos. La cardioprotección parece lograrse cambiando la señal de muerte mediada por la isquemia y la reperfusión en una señal de supervivencia mediante la modulación de las vías antioxidantes y antiinflamatorias, tal y como demuestra la activación de Akt y Bcl2 y la depresión del TNFα. Los resultados refuerzan aún más el concepto de utilizar productos naturales en enfermedades degenerativas como la cardiopatía isquémica.51
Actividades hepatoprotectoras: El extracto metanólico al 80% de las hojas de Calendula officinalis se investigó contra el daño hepático inducido por el acetaminofén en 30 ratas albinas macho. El acetaminofén produjo un 100% de mortalidad a dosis de 1gm/kg en ratones, mientras que el pretratamiento de ratones con Calendula officinalis (1,0gm/kg) redujo la muerte al 30%. El pretratamiento de los ratones con extracto de hojas (500mg/kg por vía oral, cuatro dosis con un intervalo de 12 horas) previno (p<0,05) el aumento inducido por el acetaminofén (640mg/kg) de las transaminasas séricas (GOT, GPT), la bilirrubina sérica y la fosfatasa alcalina sérica. El tratamiento posterior con tres dosis sucesivas de extracto de hojas (500mg/kg. 6 horas)) restringió el daño hepático inducido por el acetaminofén (p<0,05).52
Efectos antioxidantes: Se evaluó el potencial antioxidante de un extracto de Calendula officinalis Linn. mediante la administración oral de un extracto alcohólico de Calendula que inhibió la generación de superóxido en los macrófagos de ratones albinos suizos hembra en un 12,6% y un 38,7% a dosis de 100 y 250 mg=kg de peso corporal. La administración oral de Calendula officinalis a ratones durante 1 mes aumentó significativamente la actividad de la catalasa. El extracto produjo un aumento significativo de los niveles de glutatión en sangre e hígado. Se encontró que la glutatión reductasa aumentó, mientras que la glutatión peroxidasa disminuyó tras la administración del extracto de Caléndula.53
Actividad antihelmíntica: Las flores y hojas secas de C. officinalis tienen actividad antihelmíntica. El extracto acuoso de flores y hojas secas de C. officinalis se preparó por el método de decocción. El ensayo se realizó en lombrices de tierra adultas de la India, debido a su parecido anatómico y fisiológico con el parásito intestinal de la lombriz redonda del ser humano. Los extractos crudos de las flores y las hojas de Calendula officinalis demostraron una parálisis a los 56,5 minutos y la muerte de los gusanos a los 111,2 minutos. Las plantas contienen saponinas y también han mostrado un potencial antihelmíntico que concuerda con informes anteriores que revelan que las saponinas son conocidas por su actividad antihelmíntica.54
Actividad antiinflamatoria: El extracto etanólico de Calendula officinalis poseía una actividad antiinflamatoria significativa contra el edema de pata inducido por carragenina y dextrano. La administración oral de 250 y 500mg/kg de peso corporal de extracto de Calendula officinalis produjo una inhibición significativa (50,6 y 65,9% respectivamente) en el edema de la pata del animal inducido por carragenina y 42,9 y 42,4% respectivamente con la inflamación producida por dextrano. En el modelo antiinflamatorio crónico con formalina, la administración de 250 y 500mg/kg de peso corporal de extracto de caléndula produjo una inhibición del 32,9 y 62,3% respectivamente en comparación con los controles. Se comprobó que la producción de TNF-α por parte de un cultivo de macrófagos tratados con lipopolisacáridos (LPS) fue inhibida significativamente por el extracto. Además, el extracto inhibió de forma significativa el aumento de los niveles de citoquinas proinflamatorias IL-1β, IL-6, TNF-α e IFN-γ y de la proteína de fase aguda, la proteína C reactiva (PCR), en ratones producidos por la inyección de LPS. El nivel de ciclooxigenasa-2 (Cox-2) inducido por el LPS en el bazo de los ratones también se vio inhibido por el tratamiento con el extracto. Los resultados mostraron que la potente respuesta antiinflamatoria del extracto de C. officinalis puede estar mediada por la inhibición de las citoquinas proinflamatorias y de la Cox-2 y la subsiguiente síntesis de prostaglandinas.24 La aplicación tópica de un extracto de etanol al 70% de las flores a los ratones en una dosis de 1,2mg/año (correspondiente a 4,16mg de droga cruda) redujo el edema de oído inducido por el aceite de croton en un 20%. La aplicación externa de un extracto de dióxido de carbono de las flores (300mg/cm2) suprimió el edema de oído inducido por el aceite de croton en ratones.55
Actividad angiogénica y de cicatrización de heridas: Se evaluó la actividad angiogénica del extracto etanólico de Calendula officinalis L. (Asteraceae) y de las fracciones diclorometánica y hexánica utilizando Modelos 36 ratas y 90 huevos embrionados para evaluar las actividades de cicatrización y angiogénica de los extractos y fracciones de la planta, mediante la inducción de heridas en la piel y en la membrana corioalantoidea, respectivamente. También se comprobó el efecto de la proliferación vascular a partir del estudio para verificar la intensidad de la expresión del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) en las heridas cutáneas de las ratas. En la evaluación morfométrica se observó un aumento del área vascular y del porcentaje de áreas marcadas en rojo en la CAM tratada como control positivo al 1% (17 ß-estradiol), extracto etanólico al 1%, fracción diclorometánica al 1% y fracción hexánica al 1%, en comparación con el control de disolvente (etanol al 70%). La planimetría digital por recuento de puntos realizada en ratones dermados con extracto etanólico al 1% reveló un aumento del número de vasos sanguíneos en comparación con el control de disolvente.56 Informaron de una diferencia estadísticamente significativa en la reducción del área total de la herida en comparación con el control (p<0,05), mostrando una disminución global del 41,71% en el grupo experimental en comparación con el 14,52% en el grupo de control. Concluyen que la aplicación del extracto de caléndula aumenta significativamente la epitelización en las ulceraciones venosas crónicas. La terapia con caléndula ofrece un tratamiento no invasivo y suave para las verrugas plantares difíciles de tratar, las lesiones hiperqueratósicas dolorosas y la bursa inflamada secundaria al hallux abducto valgus.57
Actividades anticancerígenas: Los resultados obtenidos indicaron que ninguno de los extractos tuvo un efecto mitógeno directo sobre los linfocitos o timocitos humanos (índice de estimulación, SI<0,07). Entre las plantas estudiadas, C. officinalis mostró un efecto inhibidor completo sobre la proliferación de linfocitos en presencia de PHA (rango SI 0,01-0,49).58
Actividades farmacológicas in vitro de caléndula officinalis
Actividades hepatoprotectoras: Los potenciales efectos hepatoprotectores de los extractos de Calendula officinalis y morus Alba contra la citotoxicidad y el estrés oxidativo inducido por el tetracloruro de carbono (CCl4) en hepatocitos primarios de rata aislados. El efecto dosis-respuesta de diferentes concentraciones de extractos de Calendula officinalis y Morus Alba (1, 10, 100 y 1000µg/ml) sobre la disminución de la viabilidad% inducida por CCl4 en hepatocitos aislados de rata. Los hepatocitos se aislaron mediante la técnica de perfusión de colagenasa en dos pasos. La citotoxicidad se determinó evaluando la viabilidad celular y la fuga de enzimas citosólicas, como la alanina aminotransferasa (ALT), la aspartato aminotransferasa (AST) y la lactato deshidrogenasa (LDH). El estrés oxidativo se evaluó determinando el nivel de glutatión reducido (GSH) y la peroxidación lipídica, indicada por la producción de sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS). La exposición de hepatocitos de rata aislados al CCl4 causó citotoxicidad y lesiones oxidativas, manifestadas por la pérdida de viabilidad celular y el aumento significativo de las pérdidas de ALT, AST y LDH. Además, el CCl4 provocó una disminución progresiva del contenido de GSH intracelular y un aumento significativo de la acumulación de TBARS. La preincubación de los hepatocitos con extractos de Calendula officinalis o de morus alba mejoró la hepatotoxicidad y el estrés oxidativo inducido por el CCl4, como indica la mejora significativa de la viabilidad celular y las pérdidas de enzimas (ALT, AST y LDH). También se observó una mejora significativa del contenido de GSH y una disminución significativa de la formación de TBARS en comparación con las células tratadas con CCl4. El efecto dosis-respuesta de diferentes concentraciones de los extractos de Calendula officinalis y morus alba (1, 10, 100 y 1000µg/ml) sobre la disminución de la viabilidad de los hepatocitos de rata aislados inducida por el CCl4. Los resultados revelaron que el CCl4 (5mM) indujo una disminución significativa del porcentaje de viabilidad de los hepatocitos de rata aislados después de 30 minutos de incubación. Esta disminución de la viabilidad dependió del tiempo en comparación con el grupo de control.59
Actividad antibacteriana: Los extractos etanólico y acuoso de Calendula officinalis inhiben el crecimiento de las bacterias utilizadas en el estudio, a concentraciones que van de 125µg/ml a 64mg/ml. El extracto metanólico inhibió el crecimiento de S. aureus y E. coli a 64mg/ml. El extracto acuoso de Calendula officinalis mostró la mayor actividad antibacteriana contra todas las bacterias probadas. S. aureus resultó ser más susceptible que otras bacterias.60 Las actividades antibacterianas de Calendula officinalis Linn. El polvo de las hojas secas de Calendula officinalis se extrajo sucesivamente con éter de petróleo, cloroformo y etanol utilizando Soxhlet y se maceró para formar un extracto acuoso. Todos los extractos se analizaron para determinar su actividad antibacteriana y antifúngica mediante el método de difusión en pozos de agar. Los microorganismos utilizados para la actividad antibacteriana y antifúngica fueron Bacillus subtulis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsiella pneumonia, Candida albicans y Aspergillus niger. Se utilizó gentamicina 5µg/ml como estándar. Los extractos que mostraron actividad antimicrobiana se sometieron a un ensayo de concentración mínima inhibitoria por el método de diluciones dobles. Los extractos de éter de petróleo, cloroformo, etanol y agua mostraron actividad antibacteriana in vitro.61 Se estudió la actividad antimicrobiana de los extractos etanólico, metanólico, de acetona y de cloroformo de C. officinalis contra las cepas bacterianas grampositivas Escherichia coli y Staphylococcus anrens, y las cepas gramnegativas Salmonella typhae y Vibrio cholera. El extracto etanólico resultó activo contra E. coli, Vibrio cholera y Candida albicans. El extracto metanólico sólo dio resultados contra Candida albicans. El cloroformo tuvo actividad antimicrobiana contra todos los microbios, mientras que la acetona sólo la tuvo contra E. coli.62
Actividad contra el cáncer: Los extractos de flavonoides (0,05-50µg/ml) no causaron un efecto significativo en la proliferación de dos líneas celulares. Puede estar relacionado con la molécula de azúcar unida en la posición 3 de las flavonas que puede reducir su capacidad de unión a la aromatasa y otras enzimas.63 Se aislaron e identificaron trece saponinas de Calendula officinalis, C. arvensis y Hedera helix. Se investigaron las actividades mutagénicas y antimutagénicas de estos productos utilizando una técnica de incubación líquida modificada del ensayo de Salmonella/microsomal. Se utilizó la cepa de Salmonella TA98±S9. El cribado de la actividad antimutagénica se realizó con un promutágeno conocido: el benzo-pireno y el concentrado de orina mutagénico de un fumador. Las actividades antimutagénicas también se compararon con la actividad de la clorofilina. Se comprobó que todas las saponinas no eran tóxicas ni mutagénicas para dosis de 400/µg.64
Actividad antiinflamatoria: El extracto hidroalcohólico de Calendula officinalis puede suprimir las actividades de la 5-lipoxigenasa (5-LO) y la ciclooxigenasa-2 (COX-2) (enzimas clave) en la formación de eicosanoides proinflamatorios a partir del ácido araquidónico.65 La aparición de dermatitis aguda de grado 2 o superior fue significativamente menor (41% frente a 63%; P<.001) con el uso de caléndula que con trolamina. Además, los pacientes que recibieron caléndula tuvieron menos interrupciones de la radioterapia y redujeron significativamente el dolor inducido por la radiación. La caléndula es muy eficaz para la prevención de la dermatitis aguda de grado 2 o superior y debería proponerse para las pacientes sometidas a irradiación postoperatoria por cáncer de mama.66
Actividades antioxidantes: El extracto acuoso de los pétalos mostró una mayor actividad antioxidante que las hojas. Los resultados obtenidos en el presente estudio indican que las hojas y los pétalos de Calendula officinalis son una fuente potencial de antioxidantes naturales.67 Se evaluó el potencial antioxidante in vitro de un extracto alcohólico de Calendula officinalis Linn (compuesto). Se descubrió que el extracto de Calendula officinalis eliminaba los radicales superóxido generados por la fotoreducción de la riboflavina y los radicales hidroxilo generados por la reacción de Fenton, e inhibía la peroxidación lipídica in vitro. Las concentraciones necesarias para una inhibición del 50% (IC50) fueron de 500, 480 y 2000 mg=mL, respectivamente. El extracto eliminó los radicales ABTS y DPPH y el IC50 fue de 6,5 y 100 mg=mL, respectivamente.68 Para el extracto de Calendula officinalis de 7,5mg/ml de concentración, la LPO disminuyó lentamente con la dosis de 68% a 40% a 20kGy. La LPO para la concentración de 3,75mg/ml disminuyó repentinamente del 56% al 28% a la dosis de 1kGy. Luego, disminuyó lentamente con la dosis.69
Actividad anti-VIH: El extracto de cloroformo de las flores inhibió la replicación del VIH-1 en células linfocíticas MOLT-4 infectadas in vitro (IC50 0,4mg/ml). Un extracto de cloroformo también inhibió la actividad de la transcriptasa inversa del VIH-1 de forma dependiente de la dosis (ED50 51,0mg/ml).70