La electroforesis es un proceso electrocinético que separa las partículas cargadas en un fluido utilizando un campo de carga eléctrica. Se utiliza con mayor frecuencia en las ciencias de la vida para separar las moléculas de proteínas o el ADN y puede lograrse mediante varios procedimientos diferentes en función del tipo y el tamaño de las moléculas. Los procedimientos difieren en algunos aspectos, pero todos necesitan una fuente de carga eléctrica, un medio de soporte y una solución tampón. La electroforesis se utiliza en los laboratorios para la separación de moléculas en función de su tamaño, densidad y pureza.
¿Cómo funciona?
Se aplica un campo eléctrico a las moléculas y, como ellas mismas están cargadas eléctricamente, se produce una fuerza que actúa sobre ellas. Cuanto mayor sea la carga de la molécula, mayor será la fuerza aplicada por el campo eléctrico y, por lo tanto, más lejos se moverá la molécula a través del medio de soporte en relación con su masa.
Algunas aplicaciones de la electroforesis incluyen el análisis de ADN y ARN, así como la electroforesis de proteínas, que es un procedimiento médico utilizado para analizar y separar las moléculas que se encuentran en una muestra de fluido (más comúnmente muestras de sangre y orina).
Tipos de electroforesis
Por lo general, se utilizan diferentes tipos de geles como medio de soporte para la electroforesis, que pueden ser en forma de placa o de tubo, dependiendo de lo que sea más beneficioso. Las placas de gel permiten la realización simultánea de muchas muestras, por lo que se utilizan con frecuencia en los laboratorios. Sin embargo, los geles en tubo ofrecen una mejor resolución de los resultados, por lo que suelen elegirse para la electroforesis de proteínas.
El gel de agarosa se utiliza habitualmente para la electroforesis del ADN. Tiene una gran estructura de poros que permite que las moléculas más grandes se muevan con facilidad, pero no es adecuado para la secuenciación de moléculas más pequeñas.
La electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE) tiene una resolución más clara que el gel de agarosa, lo que lo hace más adecuado para el análisis cuantitativo. Esto permite identificar cómo se unen las proteínas al ADN. También se puede utilizar para desarrollar la comprensión de cómo las bacterias se están volviendo resistentes a los antibióticos a través del análisis de plásmidos.
La electroforesis 2D separa las moléculas a lo largo de un eje x y un eje y – uno las separa por carga y el otro por tamaño.